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NCI-H1650人非小细胞肺癌细胞培养说明书

2019/7/23 8:45:13发布119次查看

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过str鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。
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产品名称:nci-h1650人非小细胞肺癌细胞培养说明书
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:atcc、sciencell、iclc
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!
nci-h1650人非小细胞肺癌细胞培养说明书三、细胞生长条件: 
组成:组份
数目
细胞
 1 t-25瓶
细胞说明书
一份
细胞简介:生长特性:
贴壁生长
细胞来源:
从atcc/中科院/协和医院等地引进
培养条件:
培养基:1640 +10%fbs(推荐德国bi 04-002-1a
优等胎牛血清)
气相:空气95%,二氧化碳5%
温度:37℃
培养:
贴壁细胞1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6ml新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为1:2。
3传代步骤:将0.25%含edta胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlpbs,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
二、悬浮细胞
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清;
2.将离心好的细胞转移至t-25瓶中,并加入5-6ml新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基);
3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,第一次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。
细胞总数:
1~3*106
传代周期:
2-3天
传代比例:
1:2~1:4
换液频率:
2-3天
冻存液:
90%fbs+10%dmso

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